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La chromatographie

I. But g�n�ral :

Identifier les diff�rentes esp�ces chimiques pr�sentes dans un m�lange en comparant leur distance de d�placement vertical par capillarit�.

II. Technique

Sur une feuille de papier Wattman ou sur une plaque pour chromatographie, on trace un trait qui permettra de rep�rer la ligne de d�p�t. Sur cette phase stationnaire, sont d�pos�es les diff�rentes substances � analyser. La chromatographie dans notre exemple permettra de d�montrer que la couleur de l'�chantillon X est due au m�lange des esp�ces A et B, C �tant un m�lange de laboratoire entre A et B et X �tant l'�chantillon naturel. Une goutte de chacune des substances est d�pos�e sur la plaque.

Cette plaque est alors d�pos�e verticalement dans une cuve ferm�e contenant l'�luant (solvant qui permettra aux esp�ces de se d�placer verticalement selon leurs propri�t�s par capillarit�). Plus l'esp�ce a une affinit� forte avec l'�luant, plus sa hauteur de migration sera grande. Lorsque l'�luant atteint un centim�tre avant le sommet de la plaque, on retire celle-ci, on trace un trait � la hauteur ou est arriv� l'�luant.

On rep�re ensuite les diff�rentes t�ches, si elles sont color�es, cela ne pose pas de probl�me, sinon il faut utiliser une lampe UV.

Il reste alors � d�terminer la hauteur de migration de chaque esp�ce.

La distance parcourue par l'esp�ce se mesure de la ligne de d�p�t au centre de la t�che.

Pour un �luant et une esp�ce chimique donn�e, la distance de migration de l'esp�ce par-rapport � la distance de migration de l'�luant permet de caract�riser l'esp�ce chimique.

Ce rapport caract�ristique pour chaque esp�ce chimique et �luant se nomme rapport frontal et se d�finit comme suit :

Si la chromatographie ne r�v�le qu'une seule t�che, cela signifie que le m�lange n'�tait compos� que d'une seule esp�ce chimique. A contrario, si elle r�v�le plusieurs t�ches, l'�chantillon de d�part contenait plusieurs esp�ces chimiques.

Dans notre exemple, la substance naturelle X est bien un m�lange des esp�ces A et B et s'apparente au m�lange de laboratoire C.

 

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